Assassin's Creed segue a luta secular entre a Ordem dos Assassinos, que lutam pela paz com o livre arbítrio, e a Ordem dos Templários, que desejam a paz através do controle. O jogador está na realidade controlando um homem contemporâneo chamado Desmond Miles, que, através do uso de uma máquina chamada Animus, visualiza e controla as memórias genéticas de seus ancestrais, neste caso, as de Altaïr Ibn-La'Ahad, um membro dos Assassinos.
O jogo ocorre principalmente durante a Terceira Cruzada na Terra Santa em 1191, com a história girando em torno da Ordem Secreta dos Assassinos. Vagando por diversos lugares, Altair deve usar várias armas, assim como destreza e agilidade para concluir seus objetivos e vencer cada batalha. Assassin's Creed mescla tecnologia, design de jogos, tema e emoções em um mundo onde instiga o caos e se torna um agente de mudança vulnerável, mas poderoso.
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